ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22

หน่วยงาน จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22
นักวิจัย : เฉลิมพล คุ้มพิทักษ์
คำค้น : โคลนิง , สเตรปโตมัยซิส , อาหารเลี้ยงเชื้อ , ไลแลนเนส
หน่วยงาน : จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
ผู้ร่วมงาน : ไพเราะ ปิ่นพานิชการ , จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. บัณฑิตวิทยาลัย
ปีพิมพ์ : 2541
อ้างอิง : 9743321276 , http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/9979
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2541

งานวิจัยนี้โคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22 โดยใช้เซลล์เจ้าบ้านและพลาสมิดพาหะ 2 ระบบคือ Streptomyces lividans TK21 กับ pIJ699 หรือ pIJ702 และ E.coli DH5alpha กับ pUC18 ผลการวิจัยเมื่อใช้ Streptomyces lividans TK21 เป็นเซลล์เจ้าบ้านและ pIJ699 เป็นพลาสมิดพาหะ พบ 1 โคลนที่เสถียร ให้ชื่อโคลนนี้ว่า S-21 โดยให้แอคติวิตีของไซแลเนส 1.21 หน่วยต่อมิลลิลิตรซึ่งสูงกว่าเซลล์เจ้าบ้านประมาณ 2 เท่า แต่ไม่สามารถสกัด พลาสมิดได้ และเมื่อใช้ pIJ702 เป็นพลาสมิดพาหะพบ 1 โคลนที่ย่อยสลายไซแลนได้จากการคัดเลือกเบื้องต้นบนอาหารแข็ง แต่สูญเสียแอคติวิตีเมื่อเลี้ยงในอาหารเหลว และพาสมิดที่สกัดได้มีขนาดเท่ากับ pIJ702 แสดงว่ายีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22 และ Streptomyces lividans TK21 มีความคล้ายคลึงกันมาก จึงทำให้เกิดริคอมบิเนชันและนำเข้าสู่โครโมโซมของเซลล์เจ้าบ้าน หรือเกิดรีคอมบิเนชันและสูญเสียยีนไป ดังกรณีที่ใช้ pIJ699 และ pIJ702 เป็นพลาสมิดพาหนะตามลำดับ เมื่อใช้ E.coli DH5alpha เป็นเซลล์เจ้าบ้าน พบ 1 โคลน ให้ชื่อว่า E-8 มีแอคติวิตีของไซแลเนส 0.25 หน่วยต่อมิลลิกรัมโปรตีน ซึ่งสูงกว่าเซลล์เจ้าบ้านประมาณ 3 เท่า และพบ รีคอมบิแนนท์พลาสมิดขนาดประมาณ 4.6 กิโลเบส โดยมีชิ้นดีเอ็นเอสอดแทรกประมาณ 1.9 กิโลเบส

บรรณานุกรม :
เฉลิมพล คุ้มพิทักษ์ . (2541). การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22.
    กรุงเทพมหานคร : จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย.
เฉลิมพล คุ้มพิทักษ์ . 2541. "การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22".
    กรุงเทพมหานคร : จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย.
เฉลิมพล คุ้มพิทักษ์ . "การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22."
    กรุงเทพมหานคร : จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2541. Print.
เฉลิมพล คุ้มพิทักษ์ . การโคลนยีนไซแลเนสจาก Streptomyces sp. PC22. กรุงเทพมหานคร : จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย; 2541.