ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ
นักวิจัย : ศุภชัย สมัปปิโต
คำค้น : CLONING , EXPRESSION , PLANT POLYKETIDE SYNTHASE , GENES , ~iCassia alata,Plumbago indica~i and ~iRheum tataricum~i
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2545
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082545001235
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การศึกษานี้ได้ทำการโคลนและติดตามการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากพืชสมุนไพรไทยที่สร้างสารแอนทราควิโนน (ชุมเห็ดเทศและทาทาเรี่ยนรูบาบ) และพืชที่สร้างสารแนพโธรควิโนน (เจตมูลเพลิงแดง) ผลจากการทำ cDNA library ที่ได้จากการใช้อาร์เอ็นเอ (RNA) จากชิ้นส่วนรากของชุมเห็ดเทศ พบว่าได้ cDNA จำนวน 3 ชิ้นที่สมบูรณ์มีลำดับกรดอะมิโนคล้ายคลึงกันแต่ไม่เหมือนกันทั้งหมด เมื่อวิเคราะห์การแสดงออกของยีนด้วยเทคนิค northern blot แสดงให้เห็นว่ายีนดังกล่าวมีการแสดงออกมากในส่วนราก ซึ่งสอดคล้องกับผลการวิเคราะห์สารฟลาโวนอยด์ด้วย HPLC ที่พบสาร quercetin, naringeninและ kaempferol เป็นต้น จากนั้นนำยีนดังกล่าวไปแสดงออกและชักนำให้สร้างโปรตีนใน~iEscherichia coli~i พบว่าเอนไซม์บริสุทธิ์ที่ได้สามารถใช้สารตั้งต้นโคเอ (substrate-CoA)ได้ทั้ง aromatic และ aliphatic-CoA เมื่อทำปฏิกิริยาร่วมกับ malonyl-CoA ทำให้เกิดผลิตภัณฑ์หลากหลายชนิดในหลอดทดลอง โดยมีสารผลิตภัณฑ์หลักคือ naringeninแสดงให้เห็นว่ายีนที่แยกได้ทำหน้าที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ซาลโคลนซินเทส (chalconeSynthase, CHS) ซึ่งเกี่ยวข้องกับชีวสังเคราะห์ของสารฟลาโวนอยด์ (flavonoid) ในรากของชุมเห็ดเทศ ส่วนในกรณีของเจตมูลเพลิงแดงภายหลังการทำ cDNA library โดยใช้RNA ที่เตรียมจากชิ้นส่วนรากจะพบ cDNA จำนวน 1 ชิ้นที่สมบูรณ์ เมื่อวิเคราะห์การแสดงออกของยีนด้วยเทคนิค northern blot จะเห็นว่าการแสดงออกของยีนนี้จะพบมากในส่วนรากเมื่อนำยีนนี้ไปแสดงออกและชักนำให้สร้างโปรตีนใน ~iE. coli~i จะพบว่าเอนไซม์ที่ได้สามารถใช้ substrate-CoA ได้หลายชนิด ร่วมกับ malonyl-CoA และเกิดผลิตภัณฑ์หลักเฉพาะสารกลุ่มไพโรน (pyrone) แสดงให้เห็นว่ายีนที่แยกได้ทำหน้าที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์ไพโรนซินเทส(pyrone synthase, PS) นอกจากนี้ยังค้นพบ cDNA จำนวน 1 ชิ้นที่สมบูรณ์จากชิ้นส่วนไรโซมของทาทาเรี่ยนรูบาบ เมื่อนำยีนที่ได้มาแสดงออกและชักนำให้สร้างโปรตีนใน ~iE. coli~iพบว่าเอนไซม์บริสุทธิ์ดังกล่าวสามารถใช้ substrate-CoA ได้ทั้ง aromatic และ aliphatic-CoAเมื่อทำปฏิกิริยาร่วมกับ malonyl-CoA สามารถเกิดผลิตภัณฑ์หลักเป็นสารเรสเวอราทอล(resveratrol) นอกจากนี้ยังพบว่าเอนไซม์นี้ยังสามารถสร้างสาร naringenin, bis-noryangonin(BNY-type) และ (p-coumroyltriacetic lactone, CTAL) เกิดขึ้นในปฏิกิริยาในปริมาณเล็กน้อยอีกด้วย แสดงให้เห็นว่ายีนที่แยกได้จากรากของทาทาเรี่ยนรูบาบทำหน้าที่ควบคุมการสร้างเอนไซม์สทิลบีนซินเทส (stilbene synthase, STS) และเมื่อทำ northern blot แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของยีนนี้จะพบมากในบริเวณราก ซึ่งสอดคล้องกับผลการตรวจวิเคราะห์สารเรสเวอราทอลด้วย HPLC ที่พบปริมาณมากในส่วนรากของทาทาเรี่ยนรูบาบเช่นกัน

บรรณานุกรม :
ศุภชัย สมัปปิโต . (2545). การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ศุภชัย สมัปปิโต . 2545. "การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ศุภชัย สมัปปิโต . "การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2545. Print.
ศุภชัย สมัปปิโต . การโคลนและการแสดงออกของยีนโพลีคีไทด์ซินเทสจากชุมเห็ดเทศเจตมูลเพลิงแดงและทาทาเรี่ยนรูบาบ. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2545.