ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น
นักวิจัย : วัฒนาลัย ปานบ้านเกร็ด , Watanalai Panbangred
คำค้น : acillus thuringiensis subsp. aizawai , Beet armyworm , Biological sciences , BT-B-06-XG-14-4401 , DNA replication , Fused gene , Plant biotechnology and related agricultural science , Plant genetics , Spodoptera littoralis , ศัตรูพืช , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , หนอน , หนอนกระทู้ผัก , หนอนกระทู้หอม , ไคติเนส
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2547
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/1630
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

โครงการวิจัยนี้เป็นโครงการที่จะปรับปรุงสายพันธุ์ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai (B.t.a.) ให้มีประสิทธิภาพในการฆ่าหนอนกระทู้หอม Spodoptera exigua และหนอนกระทู้ผัก Spodoptera litura ซึ่งเป็นหนอนศัตรูพืชผลทางการเกษตรที่สำคัญของประเทศไทย ได้ดีขึ้นเมื่อเทียบกับ B.t.a. wild type ในการปรับปรุงพันธุ์ดังกล่าวจะทำได้โดยการใส่ยีนไคติเนสเข้าไปในเชื้อ B.t.a. โดยที่จากการศึกษาและจากที่ได้มีรายงานไว้พบว่าไคติเนสจะสามารถเพิ่ม ประสิทธิภาพของเชื้อ B. thuringiensis รวมทั้ง B.t.a. ในการฆ่าหนอนแมลงหลายชนิดได้ ซึ่งโดยทั่วๆ ไป เชื้อในกลุ่ม Bacillus ที่มีเอนไซม์ไคติเนสจะสร้างเอนไซม์ในระยะ vegetative stage ดังนั้นในการปรับปรุงพันธุ์ B.t.a. นี้จะปรับปรุงโดยทำให้เชื้อ B.t.a. สามารถสร้างเอนไซม์ไคติเนสที่ cloned มาจาก Bacillus licheniformis ในปริมาณที่มากและสามารถสร้างเอนไซม์ดังกล่าวในระยะเดียวกับที่เซลล์สร้าง สปอร์และสร้าง crystal toxin โดยออกแบบให้ยีนอยู่ในรูป fused chitinase gene (transcriptional fusion) โดยสร้างให้ยีนไคติเนสจาก B. licheniformis ถูกควบคุมโดย spore-specific promoter ที่มาจาก p19-cry11Aa1 operon ซึ่งจะทำให้ยีนแสดงออกและสร้างเอนไซม์ในระยะที่เซลล์สร้างสปอร์ไปพร้อมกับ การสร้าง crystal toxin ตามต้องการ นอกจากนี้จะออกแบบให้มี fused chitinase gene 2 ชนิด โดยชนิดหนึ่งจะมี ter (terminator) มาจากยีนไคติเนสและชนิดที่มี ter มาจาก cry11Aa1 เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพในการแสดงออกของยีนไคติเนส หลังจากนั้นจะทำให้fused chitinase gene ที่สร้างขึ้นนี้แทรกเข้าไปอยู่บนโครโมโซม (chromosomal engineering) ของ B.t.a. โดยการอาศัย homologous recombination ระหว่างดีเอ็นเอของ B.t.a. บนโครโมโซม และชิ้นดีเอนเอของ B.t.a. ที่ cloned ไว้บนพลาสมิดและเชื่อมต่อกับ fused chitinase gene การทำ chromosomal engineering ดังกล่าวจะทำให้ fused chitinase gene สามารถคงอยู่ (Stably maintained) ใน B.t.a. host ตลอดไป โดยไม่ต้องเลี้ยงเชื้อในอาหารที่ใส่ยาปฏิชีวินะ หลังจากนั้นจะนำเชื้อ B.t.a. ที่ปรับปรุงพันธุ์นี้ไปทดสอบประสิทธิภาพในการฆ่าหนอนกระทู้หอม (S. exigua) และ หนอนกระทู้ผัก (S. litura) เทียบกับเชื้อ B.t.a. wild type โดยคาดหวังว่าสายพันธุ์ B.t.a. ที่ปรับปรุงพันธุ์แล้วนี้จะเป็นสายพันธุ์ที่ดีและมีประสิทธิภาพสูงกว่า B.t.a. wild type ในการฆ่าหนอนแมลงทั้งสองชนิด ซึ่งเป็นแมลงศัตรูพืชที่สำคัญของพืชผลการเกษตรของประเทศไทย และสามารถนำมาประยุกต์ใช้เป็น Bioinsecticide ได้ Keyword : B. thuringiensis subsp. aizawai, B. licheniformis, fused chitinase gene, ไคติเนส, หนอนกระทู้หอม, หนอนกระทู้ผัก, chromosomal engineering, P19-cry11Aa1, ter

บรรณานุกรม :
วัฒนาลัย ปานบ้านเกร็ด , Watanalai Panbangred . (2547). การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
วัฒนาลัย ปานบ้านเกร็ด , Watanalai Panbangred . 2547. "การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
วัฒนาลัย ปานบ้านเกร็ด , Watanalai Panbangred . "การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2547. Print.
วัฒนาลัย ปานบ้านเกร็ด , Watanalai Panbangred . การทำ chromosomal engineering ของเชื้อ Bacillus thuringiensis subsp. aizawai ให้มียีนไคติเนส (fused gene) จาก Bacillus licheniformis เพื่อให้ฆ่าแมลงได้ดีขึ้น. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2547.