ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค
นักวิจัย : สหพัฒน์ บรัศว์รักษ์
คำค้น : MICA , NKG2D , polymorphism , Site-directed mutagenesis , ความหลากหลาย , มิคเอ , เอ็นเคจีทูดี
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2552
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=MRG4680180 , http://research.trf.or.th/node/2034
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ยีนมิคเอ (MICA) มีความหลากหลายมีรายงานไม่น้อยกว่า 59 อัลลีล มิคเอจะจับกับตัวรับเอ็นเคจีทูดี (NKG2D receptor) ซึ่งพบบนเซลล์ natural killer (NK) cells และ เซลล์ภูมิคุ้มกันหลายชนิด มีความเป็นไปได้ที่ ความหลากหลายของมิคเอ จะมีผลต่อความแรงในการจับกับ NKG2D receptor ซึ่งจะมีความแตกต่างต่อการกระตุ้นเซลล์ภูมิคุ้มกัน การศึกษาครั้งนี้มีจุดประสงค์เพื่อสร้างอัลลีลมิคเอผ่าเหล่าชนิดต่างๆ โดยวิธี site-directed mutagenesis โดยมีส่วน extracellular domain (α-1,α -2, α -3) เหมือนกับอัลลีลที่พบได้เฉพาะในชนชาติ โดยใช้ MICA*00201 (pSBKKU412_002) เป็นต้นแบบเพื่อสร้าง MICA*00701 และ MICA*045 ซึ่งเป็นอัลลีลที่จำเพาะในชาวผิวขาว และชาวไทยอิสาน ตามลำดับได้สำเร็จ นอกจากนี้ยังสามารถสร้าง MICA*043 และ MICA*01202 (อัลลีลที่มีความหลากหลายในส่วน α-2), MICA*038 (อัลลีลที่มีความหลากหลายในส่วน α-3), MICA*034 และ MICA*010 (อัลลีลที่มีความหลากหลายในส่วน α-1, α-2, α-3) อัลลีลผ่าเหล่าทั้งหมดผ่านการตรวจสอบความถูกต้องโดยการทำ DNA sequencing และ การทำทรานสเฟคชั่นเพื่อดูการแสดงออก เซลล์ที่ผ่านการทำทรานสเฟคชั่น สามารถนำไปใช้ศึกษาผลความหลากหลายของมิคเอต่อการกระตุ้น NK cells โดยสรุปในการสร้างอัลลีลมิคเอที่มีความหลากหลาย สำหรับการศึกษาผลความหลากหลายของมิคเอต่อการกระตุ้น NK cells เทคนิค site-directed mutagenesis เป็นวิธีที่ง่ายและมีประสิทธิภาพสูง เมื่อเทียบกับวิธีเดิม เทคนิคนี้สามารถประยุกต์ใช้กับงานต่างๆได้อย่างกว้างขวาง โดยเฉพาะการศึกษาเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีน และการดัดแปลงเวคเตอร์ เป็นต้น MICA gene is highly polymorphic with at least 59 alleles having been reported. MICA binds to the NKG2D receptor on natural killer (NK) cells and several immune cells. It is possible that the MICA polymorphisms may affect the NKG2D binding leading to different degree of immune cell activation. This study aims to generate various allelic MICA mutants which represent ethnic specific extracellular domain (α-1, α-2, α-3) polymorphisms by site-directed mutagenesis. We have successfully produced the Caucasian specific allele (MICA*00701), the northeastern Thai specific allele (MICA*045), the α-2 polymorphic variants (MICA*043 and MICA*01202), the α α-3 polymorphic variant (MICA*038) and the α-1 to α-3 polymorphic variants (MICA*034 and MICA*010) from the MICA*00201 (pSBKKU412_002) template. All mutants were verified by sequencing and successfully stably transfected to the C1R cells which were validated for MICA cell surface expressions. These stable transfectants will be used to study the effect of MICA polymorphic residues carried by these alleles on NK cell activation. In conclusion, site-directed mutagenesis is a simple and very effective method to generate allelic MICA polymorphic residues to study their effects on NK cell activations compared to the classical cloning. The technique can also be applied to other studies. It is an invaluable technique for studying protein structure-function relationships and for carrying out vector modifications.

บรรณานุกรม :
สหพัฒน์ บรัศว์รักษ์ . (2552). หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
สหพัฒน์ บรัศว์รักษ์ . 2552. "หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
สหพัฒน์ บรัศว์รักษ์ . "หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2552. Print.
สหพัฒน์ บรัศว์รักษ์ . หน้าที่ความสำคัญของโพลิมอร์ฟิสมของมิคเอต่อการกระตุ้นเซลล์เอ็นเค. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2552.