ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์
นักวิจัย : จีรัง ว่องตระกูล
คำค้น : Glutathione transferase , kinetic parameters , Site-directed mutagenesis , Stability , กลูตาไธโอนเอสทรานสเฟอเรส , การเปลี่ยนกรดอะมิโนเฉพาะที่ , คุณสมบัติทางจลน์ศาสตร์ , เสถียรภาพต่อความร้อน
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2549
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=TRG4680035 , http://research.trf.or.th/node/1758
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

กลูตาไธโอนเอสทรานสเฟอเรสเป็นกลุ่มของเอนไซม์ที่มีความสามารถในการทำลายสารพิษโดยการเร่งปฏิกิริยารวมกันของหมู่ sulthydryl ของกลูตาไธโอนกับสารประกอบหลายชนิด GSTในแมลงเป็นที่สนใจเนื่องจากมีบทบาทในการต้านยาฆ่าแมลงการศึกษาเกี่ยวกับโครงสร้างและหน้าที่ของGSTทำให้เข้าใจในคุณสมบัติของเอนไซม์นี้มากขึ้น การศึกษานี้ได้ทำการเปลี่ยนกรดอะมิโนเฉพาะที่ของเอนไซม์ AdGSTD3-3ที่ตำแหน่ง 96 (บริเวณรอยต่อระหว่างโปรตีนสองยูนิท) โดยเปลี่ยนเป็นกรดอะมิโนต่างๆกัน 5 ชนิดและสร้างเอนไซม์กลายพันธ์ของกรดอะมิโนบริเวณใกล้เคียงกรดอะมิโน 96 อีก 5 ตัว เอนไซม์กลายพันธ์ทั้งหมดได้ถูกทำให้บริสุทธ์โดยจับกับ GSTrap column จากการศึกษาทางจลน์ศาสตร์ได้พบความแตกต่างในการทำปฎิกิริยากับสับสเตรท GSH และ CDNB สารยับยั้งต่างๆรวมถึงยาฆ่าแมลง ดังนั้นการเปลี่ยนกรดอะมิโนบริเวณดังกล่าวมีผลต่อการจับกับสารที่นำมาทดสอบ ได้ทำการศึกษาเสถียรภาพต่อความร้อน และพบว่ากรดอะมิโนกลุ่มที่โพลาร์และไม่โพลาร์มีเสถียรภาพต่อความร้อนสูงกว่าเอนไซม์ต้นแบบอย่างมาก ซึ่งชี้ให้เห็นถึงความสำคัญของกรดอะมิโนที่ตำแหน่งนี้ในการคงสภาพโครงรูปของโปรตีน จากการศึกษาโครงสร้างผลึกสามมิติของโปรตีนที่มีอยู่และผลจากการศึกษาทางจลน์ศาสตร์ กรดอะมิโน96อาจจะมีผลต่อกรดอะมิโนใกล้เคียงเช่น Trp 63 ในอีกสับยูนิทและการเปลี่ยนแปลงของ Trp 63 อาจจะกระทบต่อ Gln 49 ซึ่งเป็นกรดอะมิโนบริเวณเร่งของเอนไซม์และ ควบคุมแอคทิวิทีของเอนไซม์ Glutathione S-transferases (GSTs; EC 2.5.1.18) are a family of detoxifying enzymes that catalyze the conjugation of the sulfhydryl group of glutathione to a wide variety of electrophilic compounds. The GSTs in insect are of particular interest because of their role in insecticide resistance. A knowledge of the structure and function of GSTs is required in order to understand the enzymatic properties. In this study, five mutants of Anopheles dirus at position 96, an interface residue, of AdGSTD3-3 and five neighboring residue mutants of the amino acid position 96 were obtained using PCR site directed mutagenesis. The recombinant enzymes were purified using affinity chromatography on a GSTrap column. Differences in the kinetic parameters of the mutants toward the standard substrates CDNB,GSH, inhibitor and insecticides were observed. Therefore residue changes at an interface position could affect the binding and interaction with those tested compounds. Marked difference in the thermal stability of Arg 96 mutants could be observed. The polar and non-polar residues in this position generate a more stable enzyme than that of the wild type clone, indicating an important role for this residue in structural stabilization. Based on the available crystal structure of the baseline AdGSTD3-3, and the kinetic data, Arg 96 interface residue may affect the interaction with Trp 63 in the other subunit. The positional changes in Trp 63 would then influence the interaction with Gln 49 which is an active site residue in the other subunit and modulate the catalytic activity of AdGSTD3-3.

บรรณานุกรม :
จีรัง ว่องตระกูล . (2549). กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
จีรัง ว่องตระกูล . 2549. "กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
จีรัง ว่องตระกูล . "กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2549. Print.
จีรัง ว่องตระกูล . กรดอะมิโนสำคัญในโครงสร้างโปรตีน Glutathione S-Transferase ที่สามารถควบคุมการทำงานของเอนไซม์. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2549.