ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต
นักวิจัย : สุกัญญา ยงเกียรติตระกูล
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2539
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=41883
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

จากหลักฐานข้อมูลการศึกษาที่ผ่านมา ได้บ่งชี้ ถึงความสัมพันธ์ระหว่างการดื้อยาแอนตี้โฟเลต และการ กลายพันธุ์ที่ตำแหน่ง 108 จากกรดอะมิโน serine เป็น asparagine ในเอนไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของ เชื้อมาลาเรียพลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม การศึกษานี้ต้องการ ที่จะเข้าใจความสำคัญของกรดอะมิโน serine ที่ตำแหน่ง 108 จึงได้นำเอายีนสังเคราะห์สำหรับเอ็นไซม์ไดไฮโดรเลต รีดักเทสของเชื้อพลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม มาเป็นแม่แบบใน การสร้างยีนกลายพันธุ์ โดยทำให้ตำแหน่งอะมิโนที่ 108 ซึ่งปรกติเป็น serine ถูกทดแทนด้วยกรดอะมิโนอื่นอีก 19 ชนิด จากผลการทดลองพบว่า ยีนกลายพันธุ์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส เฉพาะสายพันธุ์ซึ่งมีกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 เป็น lysine เท่านั้นที่ไม่สามารถแสดงออก (expression) โปรตีนในเชื้อแบคทีเรียได้ ในขณะที่สายพันธุ์กลายซึ่งมีกรด อะมิโนอื่น ๆ อีก 19 ชนิด ที่ตำแหน่ง 108 สามารถแสดงออก โปรตีนในแบคทีเรียในรูปของ inclusion bodies ที่มีขนาด 27 กิโลดาลตัน เมื่อนำ inclusion bodies เหล่านี้มาทำให้ คืนสภาพโดยวิธีการ refolding ในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม จะสามารถทำให้เอ็นไซม์กลับคืนสู่ภสพที่สามาระเร่งปฏิกริยา ได้ ผลการศึกษาได้พบว่า การกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนตำแหน่ง 108 มีผลกระทบต่อคุณสมบัติทางจลศาสตร์ของเอ็นไซม์ และทำ ให้การยับยั้งการทำงานของเอ็นไซม์ด้วยสารแอนตี้โฟเลต เช่น ไพริเมธามีน และไซโคลกัวนิล เปลี่ยนแปลงไป กล่าวคือ เมื่อกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ถูกแทนด้วย threonine และ asparagine จะทำให้การทำงานของเอ็นไซม์ลดลงถึง 50% เมื่อเทียบกับเอ็นไซม์สายพันธุ์แท้ (wild-type) ที่มี serine ที่ตำแหน่ง 108 ผลการทดลองยังได้พบอีกว่า ยีนสายพันธุ์ของ เอ็นไซม์ที่มีกรดอะมิโนตำแหน่ง 108 เป็น glycine, alanine, glutamine, cysteine, valine, leucine และ methionine จะมีอัตราเร่งของเอ็นไซม์ที่ต่ำลงมาก ในขณะที่ยีนกลายพันธุ์ ของเอ็นไซม์มีกรดอะมิโนตำแหน่ง 108 เป็น isoleusing, arginine, proline, aspartic acid, histidine, tyrosine, phenylalanine, tryptophan และ glutamine ไม่สามารถเร่งปฏิกริยาได้เลย จากการศึกษาคุณสมบัติทางจลศาสตร์ของเอ็นไซม์ บริสุทธิ์ที่แยกจากสายพันธุ์ 4 ชนิด ที่มีกรดอะมิโนตำแหน่ง 108 เป็น glycine, cysteine, alanine และ glutamine ตลอดจนการยับยั้งเอ็นไซม์เหล่านี้ด้วยสารแอนตี้โฟเลต เช่น ไพริเมธามีน และไซโคลกัวนิล พบว่ายีนกลายพันธุ์ของ เอ็นไซม์ที่มีกรดอะมิโนตำแหน่ง 108 เป็น glutamine ให้ เอ็นไซม์ที่ดื้อต่อสารแดนตี้โฟเลตทั้งสองชนิด และมีค่า K(,m) ต่อสัปสเตรทสูง ส่วนยีนกลายพันธุ์ของเอ็นไซม์ที่มีกรดอะมิโน glycine, cysteine และ alanine ที่ตำแหน่ง 108 นั้นไม่ดื้อต่อยาเลย เมื่อทำการศึกษาจลศาสตร์ของเอ็นไซม์ บริสุทธิ์ที่มีกรดอะมิโน asparagine และ glutamine ที่ตำแหน่ง 108 ได้พบว่า การยับยั้งการทำงานของเอ็นไซม์ ด้วยไพริเมธามีน และไซโคลกัวนิล มีลักษณะของการยับยั้ง เป็นแบบแข่งขัน (competitive inhibition) เช่นเดียว กับของเอ็นไซม์ wild-type จากข้อมูลการศึกษาสามารถ สรุปได้ว่า การกลายพันธุ์จากกรดอะมิโน serine เป็น asparagine ที่พบในเชื้อมาลาเรียที่ดื้อยาแอนตี้โฟเลตใน ธรรมชาตินั้น น่าจะเหมาะสมและเป็นประโยชน์แก่การอยู่ รอดของเชื้อมาลาเรีย ทั้งนี้เนื่องจากเอ็นไซม์กลายพันธุ์ ที่ได้นั้นมีเสถียรภาพ อีกทั้งมีความสามารถต้านทานต่อยา แอนตี้โฟเลตได้ ในขณะที่การกลายพันธุ์ไปเป็นกรดอะมิโน ชนิดอื่นนั้นไม่เหมาะสมที่จะเกิดขึ้นในธรรมชาติ

บรรณานุกรม :
สุกัญญา ยงเกียรติตระกูล . (2539). ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุกัญญา ยงเกียรติตระกูล . 2539. "ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุกัญญา ยงเกียรติตระกูล . "ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2539. Print.
สุกัญญา ยงเกียรติตระกูล . ความสัมพันธ์ระหว่างการกลายพันธุ์ของกรดอะมิโนที่ตำแหน่ง 108 ในเอ็นไซม์ไดไฮโดรโฟเลต รีดักเทส ของเชื้อ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารั่ม และการดื้อยาแอนนี้โฟเลต. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2539.