ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก
นักวิจัย : อนุศักดิ์ เกิดสิน
คำค้น : CYCLODEXTRIN , CYCLODEXTRIN GLUCANOTRANSFERASE , CHIMERIC , HOMOLOGOUS RECOMBINATION
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2546
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082546001275
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ไซโคลเดกซ์ทริน (CDs) เป็นโอลิโกแซ็กคาไรด์ที่ต่อกันเป็นวงด้วยกลูโคสจำนวน 6, 7 และ8 หน่วย มีชื่อเรียกว่า (+,a)-, (+,b)-, and (+,g)-ไซโคลเดกซ์ทริน ตามลำดับ CDs เป็นผลิตภัณฑ์ที่เกิดจากการย่อยแป้งของเอนไซม์ไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรส (CGTases) สามารถนำไปใช้ประโยชน์ในอุตสาหกรรมต่างๆ CGTase ประกอบด้วย 5 โดเมน คือ A, B, C, D and Eโดยโดเมน B จะแทรกอยู่ระหว่างโดเมน A ทำให้แบ่งโดเมน A ออกได้เป็น โดเมนย่อย A1 และ A2CGTases จากธรรมชาติ โดยทั่วไปจะผลิต CDs ทั้ง 3 ชนิด ในสัดส่วนที่ไม่เท่ากัน ซึ่งต้องเสียเวลาและต้นทุนที่แพงในการแยกไซโคลเดกซ์ทรินแต่ละชนิดให้บริสุทธิ์ ในการศึกษาครั้งนี้ต้องการหาบริเวณสำคัญที่มีผลต่อการสร้างไซโคลเดกซ์ทรินในสัดส่วนที่แตกต่างกันของเอนไซม์นี้ โดยทำการสร้างเอนไซม์ไคเมอริกด้วยวิธีโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชัน ระหว่าง (+,a)-CGTase จาก ~iPaenibacillus macerans~i และ (+,b)-CGTase จาก ~iBacillus circulars~i A11ทำการทรานสฟอร์มพลาสมิดที่มียีน (+,b)-CGTase อยู่ด้าน 5' ของยีน (+,a)-CGTase (pVR321)หรือพลาสติดที่มียีน (+,a)-CGTase อยู่ด้าน 5' ของยีน (+,b)- CGTase (pVR388) ซึ่งผ่านการตัดด้วยเอนไซม์ตัดจำเพาะที่เหมาะสม แล้วนำเข้าสู่เซลล์ที่มีศักยภาพในการเกิดรีคอมบิเนชัน จากนั้นทำการศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไคเมอริกที่ได้ จากการศึกษาได้พลาสมิดไคเมอริก2 กลุ่ม คือ พลาสมิดไคเมอริกจาก pVR321 ซึ่งยังคงให้ CD หลักเป็น (+,b)-CD พบว่าการเกิดรีคอมบิเนชันที่บริเวณโดเมน C และ D มีผลทำให้ลดการสร้าง (+,a)-CD ขณะเดียวกันเพิ่มการสร้าง (+,b)- และ (+,g)-CDs นอกจากนี้ยังพบว่าการเกิดรีคอมบิเนชันภายในโดเมนย่อย A2ที่เหนือจากบริเวณปลายของโดเมนย่อยขึ้นไปมีผลต่อการสร้าง (+,a)- และ (+,b)-CDs เพียงเล็กน้อย แต่สามารถเพิ่มสัดส่วนการสร้าง (+,g)-CD สำหรับพลาสมิดไคเมอริกจาก pVR388พบว่าส่วนใหญ่สูญเสียความสามารถในการทำงาน ยกเว้น pVR402 และ 403 ซึ่งให้ CD หลักเป็น (+,b)-CD พบว่าบริเวณเกิดรีคอมบิเนชันอยู่ด้านปลายของโดเมนย่อย A1 โดยมีบริเวณทางปลายอะมิโนของเอนไซม์ประมาณ 100 กรดอะมิโนเป็นของ (+,a)-CGTase เมื่อทำการสร้างpVR404 โดยทำการแทนที่โดเมนย่อย A2 โดเมน C, D และ E ใน pVR402 ด้วย (+,a)-CGTaseเมื่อทำการสร้าง pVR404 โดยทำการแทนที่โดเมนย่อย A2 โดเมน C, D และ E ใน pVR402 ด้วย(+,a)-CGTase ซึ่งเอนไซม์ไคเมอริกนี้ยังคงบริเวณปลายของโดเมนย่อย A1 และ B ของ (+,b)-CGTaseพบว่าสามารถสร้าง CD หลักเป็น (+,a)-CD เมื่อเปรียบเทียบกับไคเมอริก pVR402, 403 และไคเมอริกจาก pVR321 พบว่าโดเมนย่อย A2 น่าจะมีบทบาทสำคัญต่อความจำเพาะของผลิตภัณฑ์แต่การมีส่วนของ (+,b)-CGTase ในบริเวณนี้ทำให้มีการสร้าง (+,b)-CD ได้เพิ่มขึ้นมากและลดสัดส่วนการสร้าง (+,a)-CDs ได้พอสมควร ถึงแม้ว่าโดเมน A และ B จะมีความสำคัญต่อความจำเพาะของการสร้าง CDs แต่โดเมนอื่นก็มีส่วนช่วยในการสนับสนุนความจำเพาะของการสร้างCDs เช่นกัน

บรรณานุกรม :
อนุศักดิ์ เกิดสิน . (2546). การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อนุศักดิ์ เกิดสิน . 2546. "การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
อนุศักดิ์ เกิดสิน . "การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2546. Print.
อนุศักดิ์ เกิดสิน . การสร้างไซโคลเดกซ์ทรินกลูคาโนทรานสเฟอเรสไคเมอริกโดยอาศัยโฮโมโลกัสรีคอมบิเนชันและศึกษาการทำงานของเอนไซม์ไดเมอริก. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2546.