ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)
นักวิจัย : จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า
คำค้น : การแสดงของยีน , ผึ้งโพรงไทย , ยีสต์ , เอนไซม์แบบรีคอมบิแนนท์ , แอลฟากลูโคซิเดส
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2554
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=RMU5180042 , http://research.trf.or.th/node/5379
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ในงานวิจัยนี้ มุ่งเน้นที่ recombinant HBGase I, II และ III จากผึ้งโพรงไทย (Apis cerana indica) ซึ่งเป็นผึ้งเศรษฐกิจอย่างหนึ่ง ในการตรวจสอบรูปแบบการแสดงออกของยีน ทำการเก็บตัวอย่างผึ้งที่อยู่ในระยะการเจริญต่างๆ ได้แก่ ระยะไข่ ตัวอ่อน ดักแด้และตัวเต็มวัยพบว่ายีน HBGase I และ III มีการแสดงออกสูงสุดในผึ้งตัวเต็มวัยที่เป็นผึ้งออกหาอาหาร ส่วนHBGase II มีการแสดงออกสูงสุดในผึ้งระยะตัวอ่อนและดักแด้ แต่มีระดับการแสดงออกในระยะตัวเต็มวัยที่น้อยกว่าและไม่มีการแสดงออกเลยในระยะไข่ จากการค้นหาลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ยาวเต็มสายของยีน ได้ส่วนปลายสายของ HBGase III ในส่วนของ HBGase I ได้ลำดับนิวคลีโอไทด์บางส่วนที่มีความยาว 942 bp และในส่วนของ HBGase II ได้ลำดับนิวคลีโอไทด์บางส่วนที่มีความยาว 834 bp เมื่อมาพิจารณาที่ความเหมือนของลำดับนิวคลีโอไทด์ พบว่าลำดับนิวคลีโอไทด์ของ HBGase I มีความเหมือนกับยีนดังกล่าวของ A. cerana japonica isozyme I (NM_AB260890.1) ถึง 98% ในขณะที่ลำดับนิว คลีโอไทด์ของ HBGase II มีความเหมือนกับยีนดังกล่าวของ A. cerana japonica isozyme II (NM_FJ752630.1) ถึง 100% ต่อมาทำการโคลน HBGase III (ความยาวของยีนเต็มสาย 1,704 bp) เข้าสู่ pPICZαA (ซึ่งเป็น expression vector) แล้วทำการ transform เข้าสู่ยีสต์ Pichia pastoris GS115 พบว่า recombinant HBGase III มีการแสดงออกสูงสุดเมื่อถูก induce ด้วย 1% methanol เป็นเวลา 144 ชั่วโมง (7 วัน) ได้ activity ของ HBGase III ที่หลั่งออกนอกเซลล์ 6 U จากการเลี้ยงยีสต์ที่ 1.2 ลิตร นอกจากนี้ยังพบว่าเอนไซม์ดังกล่าวมี pH activity, pH stability, และ thermal stability ที่ 5.0, 4.5-7.5, และ < 500C ตามลำดับ เมื่อมาพิจารณาที่ substrate specificity พบว่า maltose และ p-nitrophenyl α-D-glucoside (PNPG) เป็นสารตั้งต้นที่เหมาะสมที่สุด

บรรณานุกรม :
จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . (2554). การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana).
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . 2554. "การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . "การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana)."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2554. Print.
จันทร์เพ็ญ จันทร์เจ้า . การทำโคลนนิ่ง การแสดงออกและการสกัดบริสุทธิ์ของแอลฟากลูโคซิเดสชนิดที่ 3 ของผึ้งโพรง (Apis cerana). กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2554.