ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells

หน่วยงาน มหาวิทยาลัยเชียงใหม่

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells
นักวิจัย : Tragoolpua K. , Intasai N. , Kasinrerk W. , Mai S. , Yuan Y. , Tayapiwatana C.
คำค้น : -
หน่วยงาน : มหาวิทยาลัยเชียงใหม่
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2551
อ้างอิง : 14726750 , 10.1186/1472-6750-8-5 , 18226275 , BBMIE , http://www.scopus.com/inward/record.url?eid=2-s2.0-39849084770&partnerID=40&md5=14a0e841282b882c246689f265927573 , http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18226275 , http://cmuir.cmu.ac.th/handle/6653943832/2494
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

Background: Expression of intracellular antibodies (intrabodies) has become a broadly applicable technology for generation of phenotypic knockouts in vivo. The method uses surface depletion of cellular membrane proteins to examine their biological function. In this study, we used this strategy to block the transport of cell surface molecule CD147 to the cell membrane. Phage display technology was introduced to generate the functional antibody fragment to CD147, and we subsequently constructed a CD147-specific scFv that was expressed intracellularly and retained in the endoplasmic reticulum by adenoviral gene transfer. Results: The recombinant antibody fragments, Fab and scFv, of the murine monoclonal antibody (clone M6-1B9) reacted specifically to CD147 by indirect enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) using a recombinant CD147-BCCP as a target. This indicated that the Fab- and scFv-M6-1B9 displaying on phage surfaces were correctly folded and functionally active. We subsequently constructed a CD147-specific scFv, scFv-M6-1B9-intrabody, in 293A cells. The expression of CD147 on 293A cell surface was monitored at 36 h after transduction by flow cytometry and demonstrated remarkable reduction. Colocalization of scFv-M6-1B9 intrabody with CD147 in the ER network was depicted using a 3D deconvolution microscopy system. Conclusion: The results suggest that our approach can generate antibody fragments suitable for decreasing the expression of CD147 on 293A cells. This study represents a step toward understanding the role of the cell surface protein, CD147. © 2008 Tragoolpua et al; licensee BioMed Central Ltd.

บรรณานุกรม :
Tragoolpua K. , Intasai N. , Kasinrerk W. , Mai S. , Yuan Y. , Tayapiwatana C. . (2551). Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells.
    เชียงใหม่ : มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ .
Tragoolpua K. , Intasai N. , Kasinrerk W. , Mai S. , Yuan Y. , Tayapiwatana C. . 2551. "Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells".
    เชียงใหม่ : มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ .
Tragoolpua K. , Intasai N. , Kasinrerk W. , Mai S. , Yuan Y. , Tayapiwatana C. . "Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells."
    เชียงใหม่ : มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ , 2551. Print.
Tragoolpua K. , Intasai N. , Kasinrerk W. , Mai S. , Yuan Y. , Tayapiwatana C. . Generation of functional scFv intrabody to abate the expression of CD147 surface molecule of 293A cells. เชียงใหม่ : มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ ; 2551.